Лаборатория МОЛЕКУЛЯРНОЙ ИММУНОГЕНЕТИКИ РАКА

Заведующий лаборатории - Лидия Павловна САЩЕНКО, д.б.н., профессор, sashchenko@genebiology.ru

Сотрудники лаборатории молекулярной иммуногенетики рака:

ГНУЧЕВ Николай Васильевич – главный научный сотрудник, советник РАН, д.б.н., профессор, член-корреспондент РАН gnuchev@ibg.ac.ru

ГАБИБОВ Александр Габибович – ведущий научный сотрудник, д.х.н., профессор, член-корреспондент РАН vera.knorre@gmail.com

ГАЛКИН Александр Васильевич – старший научный сотрудник, к.б.н. galkin@globonet.ru

ИВАНОВА Ольга Константиновна – научный сотрудник

РОМАНОВА Елена Анатольевна – научный сотрудник, к.б.н. romanova@genebiology.ru

ЯШИН Денис Владимирович – старший научный сотрудник, к.б.н. yashin_co@mail.ru

ДУХАНИНА Елена Анатольевна – научный сотрудник, к.б.н. yelenadu@rambler.ru

ЛУПКИНА Наталья Ивановна – старший лаборант-исследователь

БЕЛОГУРОВ Алексей Анатольевич – научный сотрудник, к.б.н. alexey.belogurov.jr@gmail.com

Tel.: 7(499)135-02-02; 135-97-63 Fax: 7(499)135-41-05
E-mail: sashchenko@genebiology.ru

Краткая история лаборатории

При создании института была создана группа в составе отдела под руководством Георгиева Г.П., в 1995г группа выделилась в лабораторию под руководством Гнучева Н.В. В 2005 г заведующей стала Сащенко Л.П. Тематика, связанная с изучением цитотоксического действия лимфоцитов на опухолевые клетки, оставалось неизменной в течение всего времени работы лаборатории.

Краткое введение в тематику лаборатории (указывается общая проблематика и ее место в науке – актуальность, новизна, практическая значимость).

В основе противоопухолевого иммунитета лежит способность цитолитических лимфоцитов узнавать и убивать клетки собственного организма с измененными антигенами. Показано, что цитолитические Т-лимфоциты могут убивать опухолевые клетки либо путем секреции в зону контакта клеток перфорина и гранзимов, либо за счет взаимодействия FasL лимфоцитов с Fas-рецептором клетки-мишени. Однако цитотоксичность лимфоцитов трудно объяснить однозначно действием вышеупомянутых механизмов и поиск новых цитотоксических белков имеет принципиальный подход для понимания механизмов действия иммунной системы. В ИБГ РАН был клонирован новый белок Tag7, способный узнавать пептидогликан на поверхности бактерий и активировать иммунный ответ. В рамках предыдущих проектов мы показали, что Tag7 может образовывать стабильный 1:1 комплекс с белком теплового шока Hsp70 и что этот комплекс цитотоксичен для ряда линий опухолевых клеток. ЛАК клетки, полученные на 6-ой день инкубации с интерлейкином-2, способны секретировать этот комплекс и его фрагменты при контакте с опухолевыми клетками. Мы также показали, что АТФазная реакция Hsp70 необходима для образования комплекса Tag7-Hsp70. Недавно был открыт новый ингибитор АТФазной активности – белок HspBP1. В предварительных экспериментах мы показали, что Ca2+-связывающий белок, метастазин, вовлеченный в процессы метастазирования, может повышать АТФазную активность Hsp70.

В последнее время все чаще обсуждается проблема, связанная с узнаванием цитолитическими лимфоцитами опухолевых клеток. Известно, что, стремясь выжить, опухолевые клетки используют много способов уклонения от иммунного контроля. Наиболее радикальный способ – их способность убирать молекулы HLA с поверхности клетки и становиться не узнаваемыми для цитотоксических лимфоцитов. Лимфоциты, способные бороться с такими опухолями, описаны. Это NK, NKT, γδ-Т-лимфоциты, но их перечень явно не полный. В рамках предыдущего проекта мы расширили список цитолитических лимфоцитов, узнающих HLA-отрицательные опухолевые клетки. Мы показали, что Tag7, идентифицированный на поверхности CD4+CD25+ лимфоцитов, полученных как из ЛАК клеток (на 6-ые сутки инкубации с интерлейкином-2), так и из крови здорового донора, специфически связывается с Hsp70, представленным на поверхности опухолевых клеток, обеспечивая тем самым взаимодействие FasL с Fas-рецептором и последующий апоптоз опухолевых клеток.

Повышенная экспрессия метастазина в опухолях связывают с его прямым вовлечением в процессы метастазирования. Однако, оверэкспрессия метастазина также была обнаружена в клетках костного мозга, Т-лимфоцитах, нейтрофилах и макрофагах, т.е. в клетках, участвующих в защите организма, в том числе и от опухолевой прогрессии. Исследование этих белков, регуляторов цитотоксической активности Tag7-Hsp70 комплекса, может быть актуальным для понимания механизмов цитотоксического действия ЛАК клеток.

Основные научные открытия и достижения лаборатории

  1. Показано, что Tag7 образует стабильный эквимолярный комплекс с белком Hsp70и этот комплекс способен индуцировать гибель различных линий опухолевых клеток.
  2. Показано, что высокоспецифические CD8+ лимфоциты секретируют цитотоксический Tag7-Hsp70 комплекс при взаимодействии с HLA-отрицательными опухолевыми клетками.
  3. С использованием мышиной модели была продемонстрирована цитотоксичность Tag7-Hsp70 комплекса in vivo. Введение этого комплекса мышам с трансплантированными опухолями значительно тормозит рост опухоли (23).
  4. Обнаружен новый тип CD4+-лимфоцитов человека, участвующий в борьбе с опухолевыми клетками, лишенными белков основного комплекса гистосовместимости (HLA). Показано, что Tag7, идентифицированный на поверхности CD4+CD25+-лимфоцитов, специфически связывается с Hsp70, представленным на поверхности опухолевых клеток, обеспечивая тем самым взаимодействие FasL с Fas-рецептором и индукцию апоптоза в опухолевых клетках. Цитотоксические CD4+CD25+-лимфоциты были обнаружены как в культуре ЛАК клеток (на 6-ые сутки инкубации с IL-2), так и в крови здоровых доноров (22).
  5. Показано, что Mts1 в кондиционной среде нейтрофилов образует стабильный комплекс с Tag7, усиливая его противомикробную активность (25).
  6. Показано, что белок Mts1, ранее описанный как один из ключевых белков, определяющих метастатический фенотип опухолевых клеток, способен ингибировать цитотоксическую активность Tag7-Hsp70 комплекса. Mts1 может связываться как с Hsp70, так и с Tag7, препятствуя тем самым образованию Tag7-Hsp70 цитотоксического комплекса. Добавление Mts1 к уже образованному Tag7-Hsp70 комплексу вызывает диссоциацию Tag7 из комплекса и падение цитотоксической активности (26).
  7. Обнаружено, что метастазирующие опухолевые клетки, отличающиеся высокой экспрессией Mts1, устойчивы к действию Tag7-Hsp70 комплекса (23).
  8. Установлено, что Mts1, представленный на поверхности CD4+CD25+-лимфоцитов, кооперирует с Tag7 при взаимодействии с Hsp70 на поверхности опухолевой клетки и входит в состав «узнающего» рецептора, способствуя убийству опухолевых клеток. Таким образом, лимфоцитарный Mts1 проявляет антиметастатическую активность (26).
  9. Показано, что культивирование лимфоцитов в присутствии IL-2 индуцирует появление неспецифических CD8+-лимфоцитов, убивающих HLA-отрицательные опухолевые клетки (2007, Blood). Показано, что культивирование лимфоцитов в присутствии IL-2 и мембранных фракций индуцирует появление специфических CD8+-лимфоцитов. Они приобретают способность лизировать опухолевые клетки, с мембранами которых они инкубировались (28)./li>
  10. Показано, что потеря цитотоксической активности Tag7-Hsp70 комплекса в присутствии ингибитора АТФазной активности Hsp70 белка HspBP1 осуществляется за счет связывания этих комплексов с HspBP1 с последующей агрегацией и образованием высокомолекулярных неактивных комплексов (29).
  11. Установлено, что HspBP1, присутствующий в CD8+ цитотоксических лимфоцитах, секретируется одновременно с Tag7-Hsp70 комплексом при контакте лимфоцитов с опухолевыми клетками. Цитотоксическая активность комплекса находится в обратно пропорциональной зависимости от концентрации HspBP1 (29).
  12. В гетерогенной популяции опухолевых клеток выявлены клоны, погибающие в различные промежутки времени под действием гомогенного Tag7-Hsp70 комплекса. Показано, что в этих клонах индуцируются различные апоптотические сигналы.

Научные направления лаборатории

  • Механизм действия цитотоксических белков и каталитических аутоантител.

  • Изучение белок-белкового взаимодействия.

  • Выявление и характеристика неизученных субпопуляций цитотоксических Т-лимфоцитов, участвующих в противоопухолевом иммунитете.

  • Характеристика цитотоксических белков, секретированных ЛАК-клетками.

  • Изучение изменения функциональной активности четырех белков, изучаемых в лаборатории (Tag7, Hsp70, Mts1 и HspBP1) при их взаимодействии и образовании стабильных белковых комплексов.

  • Начаты работы по выявлению белков и их фрагментов, влияющих на цитотоксические и аутоиммунные процессы в иммунном ответе.

Цитотоксические белки лимфокин-активированных киллеров (ЛАК клеток).
Л.П. Сащенко, О.Д. Кабанова, Е.А. Романова, Е.А. Духанина,
Д.В. Яшин, А.Г. Габибов, Н.В. Гнучев, Г.П. Георгиев

Исследовался механизм активации ЛАК клеток при их взаимодействии с клетками-мишенями. Показано, что изменяется фенотип ЛАК клеток, стимулированных интерлейкином-2 (IL-2): на 3-4 день инкубации ЛАК клетки были преимущественно представлены субпопуляцией натуральных киллеров, на 6-7 сутки инкубации – субпопуляцией Т лимфоцитов [1]. ЛАК клетки осуществляют свою цитотоксичность с помощью секретированных, а также ассоциированных с мембраной белков [1, 3]. Было установлено, что секреторный путь лизиса не ограничивался экзоцитозом белков, содержащихся в гранулах. ЛАК клетки были способны выделять по крайней мере 7 цитотоксических белков с мол. массой от 70 до 17 кДа по типу непрерывной секреции [1, 6]. Чтобы установить путь выделения цитотоксических агентов, мы использовали Брефелдин А, который является известным необратимым ингибитором транслокации белков из эндоплазматического ретикулума в аппарат Гольджи. Добавление его к ЛАК клеткам при их контакте с клетками-мишенями блокирует цитотоксичность кондиционной среды, допуская, что цитотоксические белки экспортируются с помощью аппарата Гольджи [15, 17]. Цитотоксичность как мембран-ассоциированных, так и секретированных белков исчезала при добавлении в инкубационную среду антител к Tag7 или к Hsp70. Добавление 5 µM АТР в среду повышала цитотоксичность, тогда как 5µM AMP-PNP полностью блокировало [15]. Кондиционная среда ЛАК клеток пропускалась через анти-Tag7 или анти-Hsp70-сефарозу, элюция 50 mM АТР приводила к отщеплению Hsp70 в первом случае и Tag7 в последнем. Все эти данные свидетельствуют о том, что ЛАК клетки выделяют Tag7-Hsp70 комплекс в ответ на контакт с клетками-мишенями [15, 17]. Было найдено, что кондиционная среда ЛАК клеток содержала, кроме комплекса Tag7-Hsp70 с мол.массой 90 кДа, различные белковые компоненты с мол. массой от 70 до 17 кДа. Цитотоксичность каждого белка подавлялась антителами как к Tag7, так и к Hsp70. Эти белки появляются как результат частичной деградации или процессинга in vivo полноразмерного комплекса. С помощью MALDI – масс-спектрометрии было показано, что белки ЛАК клеток включают фрагменты АТФазного и пептид-связывающего доменов Hsp70, а также фрагмент N-концевого участка молекулы Tag7.

Tag7/PGRP образует цитотоксический комплекс с белком теплового шока Hsp70.
Л.П. Сащенко, О.Д. Кабанова, Е.А. Романова, Е.А. Духанина,
Д.В. Яшин, А.Г. Габибов, Н.В. Гнучев, Г.П. Георгиев

Показано, что Tag7, принадлежащий к семейству PGRP, образует стабильный комплекс с белком теплового шока Hsp70. Этот комплекс вызывает апоптотическую смерть в различных опухолевых клеточных линиях даже в наномолярной концентрации. Ни Tag7, ни Hsp70, взятые отдельно не вызывают смерть клеток. Для проявления цитотоксичности необходима минимальная часть пептид-связывающего домена Hsp70 (а.к. 450-463), но для развития максимальной цитотоксичности требуется присутствие АТРазного домена и АТРазная активность. Цитотоксичность комплекса была блокирована в присутствии 5 µM AMP-PNP, негидролизуемого аналога АТР. Tag7, освобожденный их комплекса с помощью элюции АТР, не обладал цитотоксической активностью, т.е. для индукции апоптотической смерти клеток требуется образование комплекса с Hsp70, но не изменение фолдинга. Tag-Hsp70 комплекс продуцируется в клетках, трансфецированных tag7, и секретируется через аппарат Гольджи [15, 16].

Цитотоксические Т лимфоциты, несущие на поверхности Tag7, могут узнавать HLA-негативные опухолевые клетки, экспрессирующие Hsp70.
Л.П. Сащенко, Е.А. Духанина, Д.В. Яшин, О.Д. Кабанова,
Е.А. Романова, А.В. Галкин, Н.В. Гнучев, Г.П. Георгиев

Обнаружена новая популяция клеток, вовлеченных в иммунную защиту против опухолевых клеток, лишенных белков главного комплекса гистосовместимости. CD4+ CD25+ лимфоциты человека, полученные как в культуре ЛАК клеток (шестые сутки инкубации с IL 2), так и непосредственно из крови здоровых доноров могут вызывать апоптоз HLA-отрицательных клетках K562 и MOLT-4. Лимфоциты убивают эти клетки через Fas-FasL зависимый контактный механизм, который однако требует взаимодействия между Tag7 на поверхности лимфоцита и Hsp70 на поверхности клетки-мишени. Используя различные подходы (ингибирование цитотоксической активности антителами к Tag7 и Hsp70; проточную цитофлуорометрию; химическую “сшивку” белков; удаление клеток, несущих Tag7 и Hsp70) мы показали, что лимфоцитарный Tag7 может связываться с Hsp70 клеток-мишеней. Конфокальная микроскопия подтвердила существование клеточного контакта, вовлекающего Tag7. Tag7 “заякоривает” лимфоцит с клеткой мишенью в том же участке, где присутствует Fas-рецептор, обеспечивая таким образом Fas-FasL взаимодействие [22].

Члены семейства факторов нуклеотидного обмена Hsp70 влияют на цитотоксическую активность Tag7-Hsp70 комплекса.
Л.П. Сащенко, Е.А. Духанина, Д.В. Яшин, О.Д. Кабанова,
Е.А. Романова, А.Г. Габибов, Н.В. Гнучев, Г.П. Георгиев

HspBP1, изменяющий конформацию АТФазного домена Hsp70 и вызывающий диссоциацию АТФ, ингибирует цитотоксическую активность Tag7-Hsp70 комплекса. HspBP1 также может непосредственно связываться с Tag7. Третичный комплекс Tag7-HspBP1-Hsp70 обычно не токсичен для клеток. АТР не освобождает HspBP1 из третичного комплекса и не реактивирует его цитотоксичность. Взаимодействие HspBP1 с Tag7 и с Tag7-Hsp70 также наблюдалось in vivo. Опухолевые клетки CSML-O секретируют HspBP1-Tag7 комплекс в кондиционную среду, цитозоль CSML-O клеток содержит как Tag7-HspBP1, так и Tag7-HspBP1-Hsp70 комплексы. Эти комплексы не цитотоксичны. Tag7-HspBP1 комплекс также присутствует в сыворотке человека. Эти данные предполагают, что HspBP1 может регулировать Tag7-Hsp70 комплекс, блокируя его цитотоксичность.

Hsp40, повышающий АТФазную активность Hsp70, усиливает цитотоксичность Tag7-Hsp70 комплекса.

Механизм цитотоксической активности ЛАК клеток.
Л.П. Сащенко, О.Д. Кабанова, Д.В. Яшин, Н.В. Гнучев

Цитолиз клеток-мишеней, вызываемый мембранными и секреторными белками, осуществляется по различным апоптотическим механизмам. Вклад апоптотических характеристик зависит от физиологического состояния клетки-мишени, субпопуляции ЛАК клеток и времени инкубации клетки с цитотоксическими белками [2]. Было найдено, что белки ЛАК клеток вызывают широкий спектр процессов, отличающихся скоростью цитолиза, механизмом фрагментации ДНК и трансдукции цитолитического сигнала [7]. Быстрые цитолитические процессы были лизосомо- и кальций-зависимые в противоположность длительным процессам. Повышение внутриклеточного кальция приводило к активации апоптотического пути лизиса [5]. Повышение внутриклеточного уровня цикло-АМР активировало только процессы с низкой скоростью цитолиза [8]. Новая функция, способная ингибировать зависимый от белков ЛАК клеток цитолиз, была продемонстрирована для белка из фетальной сыворотки – фетуина [4]. Были изолированы клоны опухолевых клеток, погибающие под действием комплекса Tag7-Hsp70 в разные промежутки времени. В клетках, погибающий через 3 часа взаимодействия комплекса Tag7-Hsp70 были активированы каспаза 8 и каспаза 3. Длительные цитотоксические процессы были каспазо-независимые. В этих клетках активировались лизосомы и митохондрии, и клетки погибали в результате оксидативного стресса.

Анти-ДНК аутоантитела проявляют цитотоксичность на линии опухолевых клеток.
О.Д. Кабанова, А.В. Белогуров, Л.П. Сащенко, А.Г. Габибов

Цитотоксичность анти-ДНК аутоантител из сыворотки больных SLE и CLL исследовались клеточных линиях L-929, HL-60, Gaji и K562. Клетки L-929 обладали наибольшей чувствительностью к обработке антителами. Параллельно исследовалась ДНК-гидролизующая активность этих аутоантител. Полученные данные подчеркивают корреляцию между цитотоксичностью и ДНК-гидролизующей активностью. Было показано, что обработка клеток цитотоксическими анти-ДНК антителами вызывает нуклеосомную фрагментацию ДНК, характерную для апоптотической смерти клетки. Профиль зависимости от времени инкубации аутоантител с L-929 клетками позволяет предполагать вовлечение как минимум двух различных механизмов клеточной гибели. Первый пик клеточной гибели, наблюдаемый через 3 часа инкубации, полностью ингибировался при преинкубации с ингибитором каспазы YVAD-CHO, в то время как второй пик был устойчив к действию этого ингибитора [12].

Основные публикации по направлениям исследований
до 2002 года

  1. Sashchenko LP, Gnuchev NV, Lukyanova TI, Redchenko IV, Kabanova OD, Lukanidin EM, Blishchenko EY, Satpaev DK, Khaidukov SV, Chertov OY. Time-dependent changes of LAK cell phenotypes correlate with the secretion of different cytotoxic proteins. Immunol. Lett. 1993, 37:153-157. [Pubmed abstract]
  2. Sashchenko LP, Kabanova OD, Lukyanova TI, Satpaev DK, Chertov OY, Gnuchev NV. The role of apoptotic and necrotic processes in cytolysis mediated by LAK cells with different phenotypes. FEBS Lett. 1993, 335:270-272. [Pubmed abstract] [Free full text]
  3. Saschenko LP, Gnuchev NV, Redchenko IV, Kabanova OD, Lukyanova TI, Blishchenko EY, Satpaev DK, Chertov OY. Contribution of membrane-associated cytotoxic proteins to cytolysis of L929 and K562 target cells with different phenotypes. Immunol. Lett. 1994, 39:243-247. [Pubmed abstract]
  4. Chertov OY, Blishchenko EY, Satpaev DK, Saschenko LP, Lukyanova TI, Kabanova OD, Gnuchev NV. Inhibitory effect of calf serum fetuin on the activity of LAK cells derived factors and tumor necrosis factor. Immunol. Lett. 1994, 42:97-100. [Pubmed abstract]
  5. Сащенко ЛП, Кабанова ОД, Лукьянова ТИ., Гнучев НВ. Изучение роли клеток-мишеней в цитолитических процессах, индуцируемых действием ЛАК клеток. Доклады Академии наук, 1996, 346:820-823.
  6. Sashchenko LP, Lukyanova TI, Kabanova OD, Mirkina II, Yatskin ON, Pongor S, Gnuchev NV. Different pathways of the release of cytotoxic proteins in LAK cells. Immunol. Lett. 1996, 53:25-29. [Pubmed abstract]
  7. Sashchenko LP, Kabanova OD, Lukyanova TI, Blishchenko EY, Satpaev DK, Gnuchev NV. Apoptotic and necrotic cytolytic processes induced by membrane-associated proteins of LAK cells. Immunol. Lett. 1997, 59:43-46. [Pubmed abstract]
  8. Сащенко ЛП., Лукьянова ТИ, Миркина ИИ, Понгор Ш, Гнучев НВ. Влияние гранулярных протеаз и протеинкиназ на цитолитическую активность ЛАК клеток. Доклады Академии наук, 1998, 360:305-309.
  9. Сащенко ЛП, Духанина ЕА, Лукьянова ТИ, Кабанова ОД, Романова ЕА, Шаталов ЮВ, Яшин ДВ, Гнучев НВ. Молекулярные механизмы цитолитических процессов, вызываемых ЛАК клетками человека. Молекулярная биология, 2000, 34:816-820.
  10. Sashсhenko LP, Dukhanina EA, Ioudinkova ES, Iarovaia OV, Lukianova TI, Kabanova OD, Gnuchev NV, Razin SV. Non-lymphoid cultured cells posses a system controlling cellular compatibility. Journal of cellular biochemistry. 2000, 78:186-196. [Pubmed abstract] [Free full text]
  11. Духанина ЕА, Романова ЕА, Киселев СЛ, Сащенко ЛП. Белок p70 – эффекторная молекула для цитокина Tag7. Доклады Академии наук 2000, 371:397-398.

Публикации за 2002-2012 годы

2002:

  1. Kozyr AV, Sashchenko LP, Kolesnikov AV, Zelenova NA, Khaidukov SV, Ignatova AN, Bobik TV, Gabibov AG, Alekberova ZS, Suchkov SV, Gnuchev NV. Anti-DNA autoantibodies reveal toxicity to tumor cell lines. Immunol Lett. 2002, 80:41-47. [Pubmed abstract]
  2. Яшин ДВ, Духанина ЕА, Кабанова ОД, Лукьянова ТИ, Романова ЕА, Сащенко ЛП, Сколышева ЛК, Шаталов ЮВ, Гнучев НВ. Специфическая смерть L929 клеток под действием цитотоксических белков лимфоидных и эритроидных клеток. Доклады Академии наук, 2002, 383:694-697.

2003:

  1. Alexandrova ES, Ponomarenko NA, Vorobiev II, Durova OM, Suchkov SV, Alekberova ZS, Paleev FN, Sashchenko LP, Gnuchev NV and Gabibov AG. Catlytic antibodies in immune-mediated disorders. Frontiers in autoimmunity. 2003, 126-143.

2004:

  1. Sashchenko LP, Dukhanina EA, Yashin DV, Shatalov YV, Romanova EA, Korobko EV, Demin AV, Lukyanova TI, Kabanova OD, Khaidukov SV, Kiselev SL, Gabibov AG, Gnuchev NV and Georgiev GP. Peptidoglycan recognition protein Tag7 forms a cytotoxic complex with heat shok protein 70 in solution and in lymphocytes. J.Biol.Chem. 2004, 279: 2117-2124. [Pubmed abstract] [Free full text: html, pdf]
  2. Шаталов ЮВ, Сащенко ЛП, Духанина ЕА, Демин АВ, Киселев СЛ, Гнучев НВ. Hsp70 образует стабильный цитотоксический комплекс с Tag7/PGRP-S. Доклады Академии наук, 2004, 395:270-273.17.Яшин ДВ, Сащенко ЛП, Духанина ЕА, Романова ЕА, Лукьянова ТИ, Кабанова ОД, Сорокин ВА, Гнучев НВ. ЛАК клетки убивают Fas раковые клетки с помощью комплекса белков Tag7/Hsp70, секретируемого из аппарата Гольджи. Доклады Академии наук, 2004, 395:132-134.

2005:

  1. Калинина ЕВ, Пономаренко НА, Дурова ОМ, Палеев ФН, Воробьев ИИ, Кекенадзе НН, Шогенов ЗА, Земцова МЕ, Гнучев НВ, Габибов АГ, Сучков СВ Каталитические аутоантитела при аутоиммунном миокардите: клиническое и патогенетическое значение. Терапевтический архив 2005, №9: 65-70.
  2. Захарова ЕС, Прыжкова МВ, Кибардин АВ, Ермолкевич ТГ, Кадулин СГ, Гнучев НВ, Киселев СЛ. Транскрипция и мРНК сплайсинг человеческого гена лактоферрина под контролем регуляторного региона бычьего гена казеина альфа S1 в молочной железе трансгенной мыши и в эмбриональных стволовых клетках мыши. Генетика, 2005, 41:299-306.
  3. Papachroni K, Ninkina N, Wanless J, Kalofoutis AT, Gnuchev NV, Buchman VL. Peripheral Sensory Neurons Survive in the Absence of alpha- and gamma-Synucleins. Journal of molecular neuroscience, 2005, 25: 157-164.

2006:

  1. Калинина ЕВ, Воробьев ИИ, Шогенов ЗС, Пономаренко НА, Земцова МЕ, Дурова ОМ, Палеев ФН, Кекенадзе НН, Габибов АГ, Гнучев НВ, Джанашия ПХ, Мальцев КА, Сучков СВ. Феномен антитело-опосредованного катализа при аутоиммунном миокардите. Молекулярная медицина 2006, №1: 36-41.

2007:

  1. Sashchenko LP, Dukhanina EA, Shatalov YV, Yashin DV, Lukyanova TI, Kabanova OD, Romanova EA, Khaidukov SV, Galkin AV, Gnuchev NV, Georgiev GP. Cytotoxic T lymphocytes carrying a pattern recognition protein Tag7 can detect evasive, HLA-negative but Hsp70-exposing tumor cells, thereby ensuring FasL/Fas-mediated contact killing. Blood 2007, 110: 1997-2004. [Pubmed abstract]
  2. Духанина ЕА, Яшин ДВ, Лукьянова ТИ, Романова ЕА, Кабанова ОД, Шаталов ЮВ, Сащенко ЛП, Гнучев НВ. Введение цитотоксического комплекса Tag7-Hsp70 мышам с трансплантированными опухолями тормозит рост опухоли. Доклады Академии наук, 2007, 414: 277-279.

2008:

  1. Духанина ЕА, Лукьянова ТИ, Романова ЕА, Духанин АС, Сащенко ЛП. Сравнительный анализ выделения метастатического маркера S100A4 иммунными и опухолевыми клетками. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2008, 145: 85-87.
  2. Духанина ЕА, Романова ЕА, Духанин АС, Кабанова ОД, Лукьянова ТИ, Шаталов ЮВ, Яшин ДВ, Гнучев НВ, Сащенко ЛП. Природа взаимодействия и возможные функциональные свойства белкового комплекса Tag7-S100A4. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2008, 145: 151-153.

2009:

  1. Dukhanina EA, Kabanova OD, Lukyanova TI, Shatalov YV, Yashin DV, Romanova EA, Gnuchev NV, Galkin AV, Georgiev GP, Sashchenko LP. Opposite roles of metastasin (S100A4) in two potentially tumoricidal mechanisms involving human lymphocyte protein Tag7 and Hsp70. Proc Natl Acad Sci U S A. 2009 Aug 18;106(33):13963-7.
  2. Яшин Д.В., Сащенко Л.П., Кабанова О.Д., Лукьянова Т.И., Духанина Е.А., Гнучев Н.В. CD8+ популяция ЛАК клеток способна лизировать как HLA-позитивные, так и HLA-негативные раковые клеточные линии. ДАН 2009, 426, 273-274.

2010:

  1. 28. Dukhanina EA, Yashin DV, Galkin AV, Sashchenko LP. Uxpected deeds of familiar proteins: Interplay of Hsp70, PGRP-S/Tag7 and S100A4/Mts1 in host vs. cancer combat. Cell Cycle. 2010 Feb 15;9(4):676-682.

2011:

  1. Yashin DV, Dukhanina EA, Kabanova OD, Romanova EA, Lukyanova TI, Tonevitskii AG, Raynes DA, Gnuchev NV, Guerriero V, Georgiev GP, Sashchenko LP. The heat shock-binding protein (HspBP1) protects cells against the cytotoxic action of the Tag7-Hsp70 complex. J Biol Chem. 2011 Mar 25;286(12):10258-64. Epub 2011 Jan 19.
  2. Д.В. Яшин, Л.П. Cащенко, Н.В. Гнучев, Г.П. Геоpгиев, Клеточные войны с применением нановооружения БИОФИЗИКА, 2011, том 56, вып. 5, c. 857–862.

2012:

  1. Yashin DV, Dukhanina EA, Kabanova OD, Romanova EA, Lukyanova TI, Tonevitskii AG, Belogurov AA, Raynes DA, Sheludchenkov AA, Gnuchev NV, Guerriero V, Georgiev GP, Sashchenko LP. Extracellular HspBP1 inhibits formation of a cytotoxic Tag7-Hsp70 complex in vitro and in human serum. Biochimie 2012, 94, 203-206. Epub 2011 Oct 21.
  2. Д.В. Яшин, Е.А. Духанина, О.Д. Кабанова, Е.А. Романова, Т.И. Лукьянова, А.А. Шелудченков, Ю.К. Сыкулев, Н.В. Гнучев, Л.П. Сащенко Механизмы инактивации цитотоксического Tag7-Hsp70 комплекса. ДОКЛАДЫ АКАДЕМИИ НАУК, 2012, том 442, № 5, с. 712–713.

2013:

  1. Belogurov AA.Jr., Stepanov A.V., Smirnov I.V., Melamed D., Bacon A., Mamedov A.E., Boitsov V.M., Sashchenko L.P., Ponomarenko N.A., Sharanova S.N., Boyko A.N., Dubina M.V., Friboulet A., Genkin D.D., Gabibov A.G. (2013) Liposome-encapsulated peptides protect against experimental allergic encephalitis. FASEB J. 1: 222-231.
  2. Smirnov I., Belogurov A.Jr., Friboulet A., Masson P., Gabibov A., Renard P.Y. (2013) Strategies for the selection of catalytic antibodies against organophosphorus nerve agents. Chem Biol Interact. 203: 196-201.
  3. Ilyushin D.G., Smirnov I.V., Belogurov AA.Jr, Dyachenko I.A., Zharmukhamedova T.Iu., Novozhilova T.I., Bychikhin E.A., Serebryakova M.V., Kharybin O.N., Murashev A.N., Anikienko K.A., Nikolaev E.N., Ponomarenko N.A., Genkin D.D., Blackburn G.M., Masson P., Gabibov A.G. (2013) Chemical polysialylation of human recombinant butyrylcholinesterase delivers a long-acting bioscavenger for nerve agents in vivo. Proc Natl Acad Sci U S A. 110: 1243-1248.
  4. Gasparian M.E., Bobik T.V., Kim Y.V., Ponomarenko N.A., Dolgikh D.A., Gabibov A.G., Kirpichnikov M.P. (2013) Heterogeneous catalysis on the phage surface: Display of active human enteropeptidase. Biochimie. 11: 2076-2081.
  5. Шелудченков А.А., Кабанова О.Д., Сащенко Л.П., Романова Е.А., Гнучев Н.В., Яшин Д.В. (2013) Клеточная смерть опухолевых клеток линии L-929, индуцированная цитотоксическим белковым комплексом Tag7-Hsp70, аналогичная гибели этих же клеток под действием TNF-α. Доклады Академии наук. 452: 230-232.

2015:

  1. Yashin D.V., Ivanova O.K., Soshnikova N.V., Sheludchenkov A.A., Romanova E.A., Dukhanina E.A., Tonevitsky A.G., Gnuchev N.V., Gabibov A.G., Georgiev G.P., Sashchenko L.P. (2015) Tag7 (PGLYRP1) in complex with HSP70 induces alternative cytotoxic processes in tumor cells via TNFR1 receptor. J Biol Chem. 290: 21724-21731.
  2. Dukhanina E.A., Lukyanova T.I ., Romanova E.A., Guerriero V. , Gnuchev N.V., Georgiev G.P. , Yashin D.V., Sashchenko L.P. (2015) A new role for PGRP-S (Tag7) in immune defense: lymphocyte migration is induced by a chemoattractant complex of Tag7 with Mts1. Cell Cycle. 14: 3635-3643.
  3. Yashin D.М., Romanova E.A., Ivanova O.K., Sashchenko LP. (2016) The Tag7-Hsp70 cytotoxic complex induces tumor cell necroptosis via permeabilisation of lysosomes and mitochondria. Biochimie. 2016 Jan 21. pii: S0300-9084(16)00033-X. doi: 10.1016/j.biochi.2016.01.007. [Epub ahead of print]
  4. Иванова О.К., Шарапова Т.Н., Романова Е.А., Сащенко Л.П., Гнучев Н.В., Яшин Д.В. (2016) Апоптотическая гибель опухолевых клеток под действием цитотоксического комплекса Tag7-Hsp70 индуцируется через взаимодействие с рецептором TNFR1. Доклады Академии наук. 466: 245-247.
  5. Belogurov A.Jr., Kuzina E., Kudriaeva A., Kononikhin A., Kovalchuk S., Surina Y., Smirnov I., Lomakin Y., Bacheva A., Stepanov A., Karpova Y., Lyupina Y., Kharybin O., Melamed D., Ponomarenko N., Sharova N., Nikolaev E., Gabibov A. (2015) Ubiquitin-independent proteosomal degradation of myelin basic protein contributes to development of neurodegenerative autoimmunity. FASEB J. 29: 1901-1913.
  6. Smirnov I.V., Vorobiev I.I., Belogurov A.A., Genkin D.D., Deyev S.M., Gabibov A.G. (2015) Chemical Polysialylation of Recombinant Human Proteins. Methods Mol Biol. 1321: 389-404.
  7. Степанов А.В., Белогуров А.А., Kothapalli P., Шамборант О.Г., Кнорре В.Д., Телегин Г.Б., Овсепян А.А., Пономаренко Н.А., Деев С.М., Kaveri S.V., Габибов А.Г. (2015) Направленная элиминация миелин-реактивных В-клеток с применением иммунотоксинов-лигандов антигенных рецепторов. Acta naturae. 7: 79-85.
  8. Степанов А.В., Ксие Д., Дронина М.А., Кнорре В.Д., Белогуров А.А., Деев С.М., Габибов А.Г. (2015) Моделирование лиганд-рецепторных взаимодействий в режиме детекции на поверхности единичной клетки. Биологические мембраны: Журнал мембранной и клеточной биологии. 32.: 102-209.
  9. Терехов С.С., Смирнов И.В., Шамборант О.Г., Бобик Т.В., Илюшин Д.Г., Мурашев А.Н., Дьяченко И.А., Паликов В.А., Кнорре В.Д., Белогуров А.А., Пономаренко Н.А., Кузина Е.С., Генкин Д.Д., Masson P., Габибов А.Г. (2015) Химическое полисиалирование и in vivo тетрамеризация улучшают фармакокинетические характеристики биологических антидотов на основе рекомбинантной бутирилхолинэстеразы человека. Acta naturae. 7. № 4. (27): 149-154.

RU   EN

Поиск

на сайте

в Яндекс

Полезные ссылки

ФАНО

РАН

Совет по науке и образованию

Минобрнауки

Российский Фонд Фундаментальных Исследований

Российский Научный Фонд

eLIBRARY.RU

Классическая и молекулярная биология

Наука и технологии России

Постнаука

N+1

Научная Россия

Элементы

Биомолекула

Мой геном

Blastim

Biohab

Телеканал Наука 2.0

Очевидное-невероятное

Фестиваль науки

Трансгенные животные в фарминдустрии

Практическая молекулярная биология

Biocompare

Подписка на новости

Институт биологии гена РАН